nature.com تي وڃڻ لاءِ مهرباني. توهان جيڪو برائوزر ورجن استعمال ڪري رهيا آهيو ان ۾ محدود CSS سپورٽ آهي. بهترين تجربي لاءِ، اسان سفارش ڪريون ٿا ته توهان جديد برائوزر ورجن استعمال ڪريو (يا انٽرنيٽ ايڪسپلورر ۾ مطابقت واري موڊ کي بند ڪريو). اضافي طور تي، مسلسل سپورٽ کي يقيني بڻائڻ لاءِ، هن سائيٽ ۾ اسٽائل يا جاوا اسڪرپٽ شامل نه هوندو.
سنٿون 3-(اينٿراسين-9-ايل)-2-سائنو ايڪريلوئيل ڪلورائڊ 4 کي مختلف نائٽروجن نيوڪليوفائلز سان ان جي رد عمل ذريعي مختلف قسم جي انتهائي فعال هيٽروسائڪلڪ مرکبات کي گڏ ڪرڻ لاءِ استعمال ڪيو ويو. هر هڪ ٺهيل هيٽروسائڪلڪ مرڪب جي جوڙجڪ کي اسپيڪٽروسڪوپڪ ۽ عنصري تجزيي جي استعمال سان مڪمل طور تي بيان ڪيو ويو. تيرهين ناول هيٽروسائڪلڪ مرکبات مان ڏهه ملٽي ڊرگ مزاحمتي بيڪٽيريا (MRSA) جي خلاف حوصلا افزائي افاديت ڏيکاري. انهن مان، مرکبات 6، 7، 10، 13b، ۽ 14 سڀ کان وڌيڪ اينٽي بيڪٽيريل سرگرمي ڏيکاريا جن ۾ 4 سينٽي ميٽر جي ويجهو انبيڪشن زون هئا. بهرحال، ماليڪيولر ڊاکنگ مطالعي مان ظاهر ٿيو ته مرکبات ۾ پينسلين-بائنڊنگ پروٽين 2a (PBP2a) سان مختلف پابند لاڳاپا هئا، جيڪو MRSA مزاحمت لاءِ هڪ اهم هدف هو. ڪجهه مرکبات جهڙوڪ 7، 10 ۽ 14 ڪو-ڪرسٽلائزڊ ڪوئنازولينون ليگنڊ جي مقابلي ۾ PBP2a جي فعال سائيٽ تي وڌيڪ پابند لاڳاپا ۽ رابطي جي استحڪام ڏيکاريو. ان جي ابتڙ، مرڪب 6 ۽ 13b ۾ ڊاڪنگ اسڪور گهٽ هئا پر پوءِ به اهم اينٽي بيڪٽيريل سرگرمي ڏيکاري، مرڪب 6 ۾ سڀ کان گهٽ MIC (9.7 μg/100 μL) ۽ MBC (78.125 μg/100 μL) قدر هئا. ڊاڪنگ تجزيي ۾ اهم رابطي جو انڪشاف ٿيو جنهن ۾ هائيڊروجن بانڊنگ ۽ π-اسٽيڪنگ شامل آهن، خاص طور تي Lys 273، Lys 316 ۽ Arg 298 جهڙن باقيات سان، جن کي PBP2a جي ڪرسٽل ڍانچي ۾ ڪو-ڪرسٽلائزڊ ليگنڊ سان رابطي جي طور تي سڃاڻپ ڪيو ويو هو. اهي باقيات PBP2a جي اينزيميٽڪ سرگرمي لاءِ ضروري آهن. اهي نتيجا ظاهر ڪن ٿا ته ٺهيل مرکبات شايد واعدو ڪندڙ اينٽي MRSA دوائن جي طور تي ڪم ڪن، جيڪي اثرائتي علاج جي اميدوارن جي سڃاڻپ لاءِ بايو ايسي سان ماليڪيولر ڊاڪنگ کي گڏ ڪرڻ جي اهميت کي اجاگر ڪن ٿا.
هن صديءَ جي پهرين ڪجهه سالن ۾، تحقيق جون ڪوششون بنيادي طور تي دستياب شروعاتي مواد استعمال ڪندي ڪيترن ئي جديد هيٽروسائڪلڪ سسٽم جي ترڪيب لاءِ نوان، سادا طريقا ۽ طريقا تيار ڪرڻ تي مرکوز هيون.
ايڪريلونائٽريل حصن کي ڪيترن ئي قابل ذڪر هيٽروسائڪلڪ سسٽم جي ترڪيب لاءِ اهم شروعاتي مواد سمجهيو ويندو آهي ڇاڪاڻ ته اهي انتهائي رد عمل وارا مرڪب آهن. ان کان علاوه، 2-سائنو ايڪريلول ڪلورائڊ ڊيريويٽوز کي تازن سالن ۾ فارماسولوجيڪل ايپليڪيشنن جي ميدان ۾ اهم اهميت جي شين جي ترقي ۽ ترڪيب لاءِ وڏي پيماني تي استعمال ڪيو ويو آهي، جهڙوڪ دوا جي وچولي 1،2،3، اينٽي ايڇ آءِ وي، اينٽي وائرل، اينٽي ڪينسر، اينٽي بيڪٽيريل، اينٽي ڊيپريسننٽ ۽ اينٽي آڪسيڊنٽ ايجنٽ 4،5،6،7،8،9،10 جا اڳوڻا. تازو، اينٿراسين ۽ ان جي ڊيريويٽوز جي حياتياتي افاديت، جنهن ۾ انهن جي اينٽي بايوٽڪ، اينٽي ڪينسر 11،12، اينٽي بيڪٽيريل 13،14،15 ۽ حشرات مار خاصيتون 16،17 شامل آهن، تمام گهڻو ڌيان ڇڪايو آهي 18،19،20،21. ايڪريلونائٽريل ۽ اينٿيسين حصن تي مشتمل اينٽي مائڪروبيل مرکبات شڪل 1 ۽ 2 ۾ ڏيکاريا ويا آهن.
ورلڊ هيلٿ آرگنائيزيشن (ڊبليو ايڇ او) (2021) جي مطابق، اينٽي مائڪروبيل مزاحمت (AMR) صحت ۽ ترقي لاءِ هڪ عالمي خطرو آهي 22,23,24,25. مريضن جو علاج نٿو ٿي سگهي، جنهن جي نتيجي ۾ اسپتال ۾ وڌيڪ وقت رهڻ ۽ وڌيڪ مهانگي دوائن جي ضرورت پوي ٿي، انهي سان گڏ موت ۽ معذوري ۾ اضافو ٿئي ٿو. اثرائتي اينٽي مائڪروبيل دوائن جي کوٽ اڪثر ڪري مختلف انفيڪشنن جي علاج جي ناڪامي جو سبب بڻجي ٿي، خاص طور تي ڪيموٿراپي ۽ وڏين سرجري دوران.
ورلڊ هيلٿ آرگنائيزيشن 2024 جي رپورٽ موجب، ميٿيسلن مزاحمتي اسٽيفيلوڪوڪس اوريئس (MRSA) ۽ اي. ڪولي کي ترجيحي پيٿوجنز جي فهرست ۾ شامل ڪيو ويو آهي. ٻئي بيڪٽيريا ڪيترن ئي اينٽي بايوٽڪ جي مزاحمتي آهن، تنهن ڪري اهي انفيڪشن جي نمائندگي ڪن ٿا جن جو علاج ۽ ڪنٽرول ڪرڻ ڏکيو آهي، ۽ هن مسئلي کي حل ڪرڻ لاءِ نوان ۽ اثرائتي اينٽي مائڪروبيل مرڪب تيار ڪرڻ جي فوري ضرورت آهي. اينٿراسين ۽ ان جا ڊيريويٽوز مشهور اينٽي مائڪروبيل آهن جيڪي گرام-مثبت ۽ گرام-منفي بيڪٽيريا ٻنهي تي عمل ڪري سگهن ٿا. هن مطالعي جو مقصد هڪ نئين ڊيريويٽوز کي گڏ ڪرڻ آهي جيڪو انهن پيٿوجنز جو مقابلو ڪري سگهي ٿو جيڪي صحت لاءِ خطرناڪ آهن.
ورلڊ هيلٿ آرگنائيزيشن (ڊبليو ايڇ او) رپورٽ ڪري ٿو ته ڪيترائي بيڪٽيريا پيٿوجن ڪيترن ئي اينٽي بايوٽڪ جي خلاف مزاحمتي آهن، جن ۾ ميٿيسيلين مزاحمتي اسٽيفيلوڪوڪس اوريئس (ايم آر ايس اي) شامل آهي، جيڪو برادري ۽ صحت جي سار سنڀال جي سيٽنگن ۾ انفيڪشن جو هڪ عام سبب آهي. ايم آر ايس اي انفيڪشن وارن مريضن ۾ دوا جي حساس انفيڪشن وارن مريضن جي ڀيٽ ۾ موت جي شرح 64 سيڪڙو وڌيڪ هجڻ جي رپورٽ ڪئي وئي آهي. ان کان علاوه، اي ڪولي هڪ عالمي خطرو پيدا ڪري ٿو ڇاڪاڻ ته ڪارباپينم مزاحمتي انٽروبيڪٽيريا (يعني، اي ڪولي) جي خلاف دفاع جي آخري لائن ڪولسٽين آهي، پر ڪولسٽين مزاحمتي بيڪٽيريا تازو ئي ڪيترن ئي ملڪن ۾ رپورٽ ڪيا ويا آهن. 22,23,24,25
تنهن ڪري، ورلڊ هيلٿ آرگنائيزيشن گلوبل ايڪشن پلان آن اينٽي مائڪروبيل رزسٽنس 26 جي مطابق، نئين اينٽي مائڪروبيل جي دريافت ۽ ترڪيب جي فوري ضرورت آهي. اينٿراسين ۽ ايڪريلونائٽرائل جي وڏي صلاحيت کي اينٽي بيڪٽيريل 27، اينٽي فنگل 28، اينٽي ڪينسر 29 ۽ اينٽي آڪسيڊنٽ 30 ايجنٽ جي طور تي ڪيترن ئي شايع ٿيل مقالن ۾ اجاگر ڪيو ويو آهي. ان حوالي سان، اهو چئي سگهجي ٿو ته اهي نڪتل ميٿيسلن مزاحمتي اسٽيفيلوڪوڪس اوريئس (MRSA) جي خلاف استعمال لاءِ سٺا اميدوار آهن.
پوئين ادب جي جائزي اسان کي انهن ڪلاسن ۾ نوان نڪتل شيون گڏ ڪرڻ جي ترغيب ڏني. تنهن ڪري، موجوده مطالعي جو مقصد اينٿراسين ۽ ايڪريلونائٽريل حصن تي مشتمل ناول هيٽروسائڪلڪ سسٽم کي ترقي ڪرڻ، انهن جي اينٽي مائڪروبيل ۽ اينٽي بيڪٽيريل اثرائتي جو جائزو وٺڻ، ۽ ماليڪيولر ڊاکنگ ذريعي پينسلين-بائنڊنگ پروٽين 2a (PBP2a) سان انهن جي امڪاني پابند رابطي جي جاچ ڪرڻ هو. پوئين مطالعي تي تعمير ڪندي، موجوده مطالعي هيٽروسائڪلڪ سسٽم جي ترکیب، حياتياتي تشخيص، ۽ ڪمپيوٽيشنل تجزيو جاري رکيو ته جيئن طاقتور PBP2a روڪڻ واري سرگرمي سان واعدو ڪندڙ اينٽي ميٿيسلن-مزاحمتي اسٽيفيلوڪوڪس اوريئس (MRSA) ايجنٽن جي سڃاڻپ ڪري سگهجي 31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42,43,44,45,46,47,48,49.
اسان جي موجوده تحقيق اينٿراسين ۽ ايڪريلونائٽريل حصن تي مشتمل ناول هيٽروسائڪلڪ مرکبات جي ترڪيب ۽ اينٽي مائڪروبيل تشخيص تي ڌيان ڏئي ٿي. 3-(اينٿراسين-9-yl)-2-سائنو ايڪريلول ڪلورائڊ 4 تيار ڪيو ويو ۽ ناول هيٽروسائڪلڪ سسٽم جي تعمير لاءِ بلڊنگ بلاڪ طور استعمال ڪيو ويو.
مرڪب 4 جي بناوت کي اسپيڪٽرل ڊيٽا استعمال ڪندي طئي ڪيو ويو. 1H-NMR اسپيڪٽرم 9.26 ppm تي CH= جي موجودگي ڏيکاري، IR اسپيڪٽرم 1737 cm−1 تي ڪاربونيل گروپ ۽ 2224 cm−1 تي سائانو گروپ جي موجودگي ڏيکاري، ۽ 13CNMR اسپيڪٽرم پڻ تجويز ڪيل بناوت جي تصديق ڪئي (تجرباتي سيڪشن ڏسو).
3-(anthracen-9-yl)-2-cyanoacryloyl chloride 4 جي ترڪيب خوشبودار گروپن 250، 41، 42، 53 جي هائيڊرولائسز ذريعي ايٿانولڪ سوڊيم هائيڊرو آڪسائيڊ محلول (10٪) سان مڪمل ڪئي وئي ته جيئن تيزاب 354، 45، 56 ملي سگهن، جن کي پوءِ پاڻي جي غسل تي ٿائنيل ڪلورائڊ سان علاج ڪيو ويو ته جيئن ايڪريلائل ڪلورائڊ ڊيريويٽو 4 کي وڌيڪ پيداوار (88.5٪) ملي سگهي، جيئن شڪل 3 ۾ ڏيکاريل آهي.
متوقع اينٽي بيڪٽيريل افاديت سان نوان هيٽروسائڪلڪ مرڪب ٺاهڻ لاءِ، مختلف ڊائنوڪيوفائلز سان ايسل ڪلورائڊ 4 جو رد عمل ڪيو ويو.
ايسڊ ڪلورائڊ 4 کي هڪ ڪلاڪ لاءِ 0° تي هائيڊرازين هائيڊريٽ سان علاج ڪيو ويو. بدقسمتي سان، پائرازولون 5 حاصل نه ڪيو ويو. پراڊڪٽ هڪ ايڪريلامائيڊ ڊيريويٽو هو جنهن جي بناوت جي تصديق اسپيڪٽرل ڊيٽا ذريعي ڪئي وئي هئي. ان جي IR اسپيڪٽرم ۾ 1720 cm−1 تي C=O، 2228 cm−1 تي C≡N ۽ 3424 cm−1 تي NH جا جذب بينڊ ڏيکاريا ويا. 1H-NMR اسپيڪٽرم 9.3 ppm تي اولفن پروٽان ۽ NH پروٽان جو ايڪسچينج سنگلٽ سگنل ڏيکاريو (تجرباتي سيڪشن ڏسو).
ايسڊ ڪلورائڊ 4 جا ٻه مول فينائل هائيڊرازين جي هڪ مول سان رد عمل ظاهر ڪيا ويا ته جيئن N-phenylacryloylhydrazine derivative 7 سٺي پيداوار (77٪) ۾ حاصل ڪري سگهجي (شڪل 5). 7 جي جوڙجڪ جي تصديق انفراريڊ اسپيڪٽرو اسڪوپي ڊيٽا ذريعي ڪئي وئي، جنهن 1691 ۽ 1671 cm−1 تي ٻن C=O گروپن جي جذب، 2222 cm−1 تي CN گروپ جي جذب ۽ 3245 cm−1 تي NH گروپ جي جذب ڏيکاري، ۽ ان جي 1H-NMR اسپيڪٽرم CH گروپ کي 9.15 ۽ 8.81 ppm تي ۽ NH پروٽان کي 10.88 ppm تي ڏيکاريو (تجرباتي سيڪشن ڏسو).
هن مطالعي ۾، ايسل ڪلورائڊ 4 جي 1,3-ڊائنوڪليوفيلس سان رد عمل جي جاچ ڪئي وئي. ايسل ڪلورائڊ 4 جو علاج 2-امينوپائريڊائن سان 1,4-ڊائي آڪسين ۾ TEA سان ڪمري جي حرارت تي بنياد طور تي ايڪريلامائيڊ ڊيريويٽو 8 (شڪل 5) سان ڪيو ويو، جنهن جي جوڙجڪ کي اسپيڪٽرل ڊيٽا استعمال ڪندي سڃاڻپ ڪيو ويو. IR اسپيڪٽرا 2222 cm−1 تي سائانو اسٽريچنگ جا جذب بينڊ ڏيکاريا، NH 3148 cm−1 تي، ۽ ڪاربونيل 1665 cm−1 تي؛ 1H NMR اسپيڪٽرا 9.14 ppm تي اولفين پروٽان جي موجودگي جي تصديق ڪئي (تجرباتي سيڪشن ڏسو).
مرڪب 4 ٿيوريا سان رد عمل ڪري پيريميڊينيٿيون 9 ڏئي ٿو؛ مرڪب 4 ٿيوسيميڪاربازائيڊ سان رد عمل ڪري ٿو ٿيوپيرازول ڊيريويٽو 10 ڏئي ٿو (شڪل 5). مرڪب 9 ۽ 10 جي بناوتن جي تصديق اسپيڪٽرل ۽ عنصري تجزيي ذريعي ڪئي وئي (تجرباتي سيڪشن ڏسو).
ٽيٽرازين-3-ٿيول 11 مرڪب 4 جي رد عمل سان ٿائيڪاربازائيڊ سان 1,4-ڊائنوڪليوفائل (شڪل 5) جي طور تي تيار ڪيو ويو، ۽ ان جي جوڙجڪ جي تصديق اسپيڪٽروسڪوپي ۽ عنصري تجزيي ذريعي ڪئي وئي. انفراريڊ اسپيڪٽرم ۾، C=N بانڊ 1619 cm−1 تي ظاهر ٿيو. ساڳئي وقت، ان جي 1H-NMR اسپيڪٽرم 7.78–8.66 ppm تي خوشبودار پروٽان ۽ 3.31 ppm تي SH پروٽان جي ملٽي پليٽ سگنلن کي برقرار رکيو (تجرباتي سيڪشن ڏسو).
ايڪريلوئيل ڪلورائڊ 4 1,2-ڊائنوبينزين، 2-امينوٿيوفينول، اينٿرانيلڪ ايسڊ، 1,2-ڊائنوٿين، ۽ ايٿانولامائن سان 1,4-ڊائنوڪليوفيلس جي طور تي رد عمل ڪري ٿو ته جيئن نوان هيٽروسائڪلڪ سسٽم ٺاهي سگهن (13-16).
انهن نئين ٺهيل مرڪبن جي بناوتن جي تصديق اسپيڪٽرل ۽ عنصري تجزيي ذريعي ڪئي وئي (تجرباتي سيڪشن ڏسو). 2-هائيڊروڪسي فينائل ايڪريلامائيڊ ڊيريويٽو 17 2-امينوفينول سان رد عمل ذريعي ڊائنوڪيوفائل (شڪل 6) جي طور تي حاصل ڪيو ويو، ۽ ان جي بناوت جي تصديق اسپيڪٽرل ۽ عنصري تجزيي ذريعي ڪئي وئي. مرڪب 17 جي انفراريڊ اسپيڪٽرم ڏيکاريو ته C=O ۽ C≡N سگنل ترتيب وار 1681 ۽ 2226 cm−1 تي ظاهر ٿيا. ساڳئي وقت، ان جي 1H-NMR اسپيڪٽرم اولفين پروٽان جي سنگلٽ سگنل کي 9.19 پي پي ايم تي برقرار رکيو، ۽ OH پروٽان 9.82 پي پي ايم تي ظاهر ٿيو (تجرباتي سيڪشن ڏسو).
ڪمري جي حرارت تي ڊاءِ آڪسين ۾ هڪ نيوڪليوفائل (مثال طور، ايٿيلامائن، 4-ٽولوئڊين، ۽ 4-ميٿوڪسينيلائن) سان ايسڊ ڪلورائڊ 4 جو رد عمل هڪ محلول جي طور تي ۽ TEA هڪ ڪيٽالسٽ جي طور تي سائي ڪرسٽل لائن ايڪريلامائيڊ ڊيريويٽوز 18، 19a، ۽ 19b فراهم ڪيو. مرڪب 18، 19a، ۽ 19b جي عنصري ۽ اسپيڪٽرل ڊيٽا انهن ڊيريويٽوز جي بناوت جي تصديق ڪئي (تجرباتي سيڪشن ڏسو) (شڪل 7).
مختلف مصنوعي مرڪبن جي antimicrobial سرگرمي جي اسڪريننگ کان پوءِ، مختلف نتيجا حاصل ڪيا ويا جيئن ٽيبل 1 ۽ شڪل 8 ۾ ڏيکاريل آهي (شڪل فائل ڏسو). سڀني آزمائشي مرڪبن گرام-مثبت بيڪٽيريا MRSA جي خلاف مختلف درجا روڪي ڏيکاريا، جڏهن ته گرام-منفي بيڪٽيريا Escherichia coli سڀني مرڪبن جي خلاف مڪمل مزاحمت ڏيکاري. آزمائشي مرڪبن کي MRSA جي خلاف روڪي زون جي قطر جي بنياد تي ٽن درجن ۾ ورهائي سگهجي ٿو. پهرين درجو سڀ کان وڌيڪ سرگرم هو ۽ پنج مرڪبن تي مشتمل هو (6، 7، 10، 13b ۽ 14). انهن مرڪبن جي روڪي زون جو قطر 4 سينٽي ميٽر جي ويجهو هو؛ هن درجي ۾ سڀ کان وڌيڪ سرگرم مرڪبن مرڪبن 6 ۽ 13b هئا. ٻيو درجو اعتدال پسند سرگرم هو ۽ ٻين پنجن مرڪبن تي مشتمل هو (11، 13a، 15، 18 ۽ 19a). انهن مرڪبن جو روڪي زون 3.3 کان 3.65 سينٽي ميٽر تائين هو، جنهن ۾ مرڪب 11 3.65 ± 0.1 سينٽي ميٽر جو سڀ کان وڏو روڪي زون ڏيکاري ٿو. ٻئي طرف، آخري گروپ ۾ ٽي مرڪب (8، 17 ۽ 19b) شامل هئا جن ۾ گهٽ ۾ گهٽ antimicrobial سرگرمي (3 سينٽي ميٽر کان گهٽ) هئي. شڪل 9 مختلف روڪٿام وارن علائقن جي ورڇ کي ڏيکاري ٿي.
آزمائشي مرڪبن جي antimicrobial سرگرمي جي وڌيڪ جاچ ۾ هر مرڪب لاءِ MIC ۽ MBC جو تعين شامل هو. نتيجا ٿورو مختلف هئا (جيئن جدول 2، 3 ۽ شڪل 10 ۾ ڏيکاريل آهي (شڪل فائل ڏسو))، مرڪب 7، 11، 13a ۽ 15 کي ظاهري طور تي بهترين مرڪب جي طور تي ٻيهر درجه بندي ڪيو ويو آهي. انهن ۾ ساڳيا گهٽ ۾ گهٽ MIC ۽ MBC قدر هئا (39.06 μg/100 μL). جيتوڻيڪ مرڪب 7 ۽ 8 ۾ گهٽ MIC قدر هئا (9.7 μg/100 μL)، انهن جا MBC قدر وڌيڪ هئا (78.125 μg/100 μL). تنهن ڪري، انهن کي اڳ ذڪر ڪيل مرڪبن کان ڪمزور سمجهيو ويندو هو. بهرحال، اهي ڇهه مرڪب انهن مان سڀ کان وڌيڪ اثرائتو هئا جيڪي جانچيا ويا هئا، ڇاڪاڻ ته انهن جا MBC قدر 100 μg/100 μL کان گهٽ هئا.
مرڪب (10، 14، 18 ۽ 19b) ٻين آزمائشي مرڪبن جي مقابلي ۾ گهٽ سرگرم هئا ڇاڪاڻ ته انهن جي MBC قدر 156 کان 312 μg/100 μL تائين هئي. ٻئي طرف، مرڪب (8، 17 ۽ 19a) گهٽ ۾ گهٽ اميد افزا هئا ڇاڪاڻ ته انهن ۾ سڀ کان وڌيڪ MBC قدر هئا (ترتيب وار 625، 625 ۽ 1250 μg/100 μL).
آخر ۾، جدول 3 ۾ ڏيکاريل برداشت جي سطحن جي مطابق، آزمائشي مرڪبن کي انهن جي عمل جي طريقي جي بنياد تي ٻن درجن ۾ ورهائي سگهجي ٿو: جراثيم ڪش اثر سان مرکبات (7، 8، 10، 11، 13a، 15، 18، 19b) ۽ جراثيم ڪش اثر سان مرکبات (6، 13b، 14، 17، 19a). انهن مان، مرڪب 7، 11، 13a ۽ 15 کي ترجيح ڏني ويندي آهي، جيڪي تمام گهٽ ڪنسنٽريشن (39.06 μg/100 μL) تي مارڻ واري سرگرمي کي ظاهر ڪن ٿا.
تيرهن مرڪبن مان ڏهه آزمايا ويا جيڪي اينٽي بايوٽڪ-مزاحمتي ميٿيسلن-مزاحمتي اسٽيفيلوڪوڪس اوريئس (MRSA) جي خلاف صلاحيت ڏيکاري. تنهن ڪري، وڌيڪ اينٽي بايوٽڪ-مزاحمتي پيٿوجنز (خاص طور تي مقامي آئسوليٽس جيڪي پيٿوجنڪ گرام-مثبت ۽ گرام-منفي بيڪٽيريا کي ڍڪيندا آهن) ۽ پيٿوجنڪ خمير سان وڌيڪ اسڪريننگ جي سفارش ڪئي وئي آهي، انهي سان گڏ هر مرڪب جي سائيٽوٽوڪسڪ ٽيسٽنگ ان جي حفاظت جو جائزو وٺڻ لاءِ.
ميٿيسلن مزاحمتي اسٽيفيلوڪوڪس اوريئس (MRSA) ۾ پينسلين-بائنڊنگ پروٽين 2a (PBP2a) جي انابيٽرز جي طور تي ٺهيل مرکبات جي صلاحيت جو جائزو وٺڻ لاءِ ماليڪيولر ڊاکنگ اسٽڊيز ڪيون ويون. PBP2a بيڪٽيريا سيل وال بايو سنٿيسس ۾ شامل هڪ اهم اينزائم آهي، ۽ هن اينزائم جي روڪٿام سيل وال جي ٺهڻ ۾ مداخلت ڪري ٿي، آخرڪار بيڪٽيريا ليسس ۽ سيل ڊيٿ 1 جو سبب بڻجندي آهي. ڊاکنگ جا نتيجا ٽيبل 4 ۾ درج ڪيا ويا آهن ۽ ضمني ڊيٽا فائل ۾ وڌيڪ تفصيل سان بيان ڪيا ويا آهن، ۽ نتيجا ڏيکارين ٿا ته ڪيترن ئي مرکبات PBP2a لاءِ مضبوط پابند لاڳاپو ڏيکاريو، خاص طور تي اهم فعال سائيٽ باقيات جهڙوڪ Lys 273، Lys 316، ۽ Arg 298. هائيڊروجن بانڊنگ ۽ π-اسٽيڪنگ سميت رابطي، ڪو-ڪرسٽلائيزڊ ڪوئنازولينون ليگنڊ (CCL) سان تمام گهڻيون ملندڙ جلندڙ هيون، جيڪي طاقتور انابيٽرز جي طور تي انهن مرکبات جي صلاحيت کي ظاهر ڪن ٿيون.
ماليڪيولر ڊاڪنگ ڊيٽا، ٻين ڪمپيوٽيشنل پيرا ميٽرز سان گڏ، مضبوطيءَ سان تجويز ڪيو ته PBP2a جي روڪٿام انهن مرکبن جي مشاهدي واري اينٽي بيڪٽيريل سرگرمي لاءِ ذميوار اهم ميڪانيزم هو. ڊاڪنگ اسڪور ۽ روٽ مين اسڪوائر ڊيويئيشن (RMSD) قدرن وڌيڪ پابند لاڳاپي ۽ استحڪام کي ظاهر ڪيو، هن مفروضي جي حمايت ڪندي. جيئن جدول 4 ۾ ڏيکاريل آهي، جڏهن ته ڪيترن ئي مرکبن ۾ سٺي پابند لاڳاپي ڏيکاري وئي، ڪجهه مرکبات (مثال طور، 7، 9، 10، ۽ 14) ۾ ڪو-ڪرسٽلائزڊ ليگنڊ جي ڀيٽ ۾ وڌيڪ ڊاڪنگ اسڪور هئا، جيڪو ظاهر ڪري ٿو ته انهن وٽ PBP2a جي فعال سائيٽ جي باقيات سان مضبوط رابطي ٿي سگهي ٿي. جڏهن ته، سڀ کان وڌيڪ بايو ايڪٽو مرکبات 6 ۽ 13b ٻين ليگنڊن جي مقابلي ۾ ٿورو گهٽ ڊاڪنگ اسڪور (ترتيب وار -5.98 ۽ -5.63) ڏيکاريا. اهو مشورو ڏئي ٿو ته جيتوڻيڪ ڊاڪنگ اسڪور کي پابند لاڳاپي جي اڳڪٿي ڪرڻ لاءِ استعمال ڪري سگهجي ٿو، ٻيا عنصر (مثال طور، حياتياتي ماحول ۾ ليگنڊ استحڪام ۽ ماليڪيولر رابطي) پڻ اينٽي بيڪٽيريل سرگرمي کي طئي ڪرڻ ۾ اهم ڪردار ادا ڪن ٿا. خاص طور تي، سڀني ٺهيل مرڪبن جي RMSD قدر 2 Å کان گهٽ هيون، انهي ڳالهه جي تصديق ڪندي ته انهن جا ڊاکنگ پوز ساخت جي لحاظ کان ڪو-ڪرسٽلائيزڊ ليگينڊ جي پابند ترتيب سان مطابقت رکن ٿا، طاقتور PBP2a انابيٽرز جي طور تي انهن جي صلاحيت کي وڌيڪ سپورٽ ڪن ٿا.
جيتوڻيڪ ڊاکنگ اسڪور ۽ آر ايم ايس قدر قيمتي اڳڪٿيون مهيا ڪن ٿا، انهن ڊاڪنگ نتيجن ۽ اينٽي مائڪروبيل سرگرمي جي وچ ۾ لاڳاپو هميشه پهرين نظر ۾ واضح ناهي. جيتوڻيڪ PBP2a جي روڪٿام کي مضبوط طور تي اينٽي مائڪروبيل سرگرمي تي اثر انداز ٿيندڙ هڪ اهم عنصر جي طور تي سپورٽ ڪيو ويو آهي، ڪيترائي فرق اهو ظاهر ڪن ٿا ته ٻيون حياتياتي خاصيتون پڻ اهم ڪردار ادا ڪن ٿيون. مرڪب 6 ۽ 13b سڀ کان وڌيڪ اينٽي مائڪروبيل سرگرمي ڏيکاري، ٻنهي جو انبيڪشن زون قطر 4 سينٽي ميٽر ۽ گهٽ ۾ گهٽ MIC (9.7 μg/100 μL) ۽ MBC (78.125 μg/100 μL) قدر، مرڪب 7، 9، 10 ۽ 14 جي مقابلي ۾ انهن جي گهٽ ڊاکنگ اسڪور جي باوجود. اهو مشورو ڏئي ٿو ته جيتوڻيڪ PBP2a جي روڪٿام اينٽي مائڪروبيل سرگرمي ۾ حصو وٺندي آهي، بيڪٽيريا جي ماحول ۾ حل پذيري، حياتياتي دستيابي ۽ رابطي جي حرڪت جهڙا عنصر پڻ مجموعي سرگرمي تي اثر انداز ٿين ٿا. شڪل 11 انهن جي ڊاڪنگ پوز کي ڏيکاري ٿي، اهو ظاهر ڪري ٿي ته ٻئي مرڪب، جيتوڻيڪ نسبتا گهٽ بائنڊنگ اسڪور سان، اڃا تائين PBP2a جي اهم باقيات سان لهه وچڙ ڪرڻ جي قابل آهن، ممڪن طور تي انبيڪشن ڪمپليڪس کي مستحڪم ڪن ٿا. هي نمايان ڪري ٿو ته جڏهن ماليڪيولر ڊاکنگ PBP2a جي روڪٿام ۾ اهم بصيرت فراهم ڪري ٿي، ته انهن مرکبات جي حقيقي دنيا جي antimicrobial اثرات کي مڪمل طور تي سمجهڻ لاءِ ٻين حياتياتي عنصرن تي غور ڪيو وڃي.
PBP2a (PDB ID: 4CJN) جي ڪرسٽل ڍانچي کي استعمال ڪندي، ميٿيسلن مزاحمتي اسٽيفيلوڪوڪس اوريئس (MRSA) جي پينسلين-بائنڊنگ پروٽين 2a (PBP2a) سان ڊاک ٿيل سڀ کان وڌيڪ فعال مرڪب 6 ۽ 13b جا 2D ۽ 3D رابطي جا نقشا ٺاهيا ويا. اهي نقشا انهن مرکبن جي رابطي جي نمونن جو مقابلو ٻيهر ڊاک ٿيل ڪو-ڪرسٽلائيزڊ ڪوئنازولينون ليگنڊ (CCL) سان ڪن ٿا، اهم رابطي کي اجاگر ڪن ٿا جهڙوڪ هائيڊروجن بانڊنگ، π-اسٽيڪنگ، ۽ آئنڪ رابطي.
ڪمپائونڊ 7 لاءِ به ساڳيو نمونو ڏٺو ويو، جنهن ۾ ڪمپائونڊ 10 لاءِ نسبتاً وڌيڪ ڊاڪنگ اسڪور (-6.32) ۽ هڪجهڙو انبيڪشن زون قطر (3.9 سينٽي ميٽر) ڏيکاريو ويو. تنهن هوندي به، ان جو MIC (39.08 μg/100 μL) ۽ MBC (39.06 μg/100 μL) خاص طور تي وڌيڪ هئا، جيڪو ظاهر ڪري ٿو ته ان کي اينٽي بيڪٽيريل اثر ڏيکارڻ لاءِ وڌيڪ ڪنسنٽريشن جي ضرورت آهي. اهو مشورو ڏئي ٿو ته جيتوڻيڪ ڪمپائونڊ 7 ڊاڪنگ اسٽڊيز ۾ مضبوط پابند لاڳاپو ڏيکاريو، بايو دستيابي، سيلولر اپٽيڪ، يا ٻيون فزيڪو ڪيميڪل خاصيتون ان جي حياتياتي اثرائتي کي محدود ڪري سگهن ٿيون. جيتوڻيڪ ڪمپائونڊ 7 بيڪٽيريا مار خاصيتون ڏيکاريون، اهو مرڪب 6 ۽ 13b جي مقابلي ۾ بيڪٽيريا جي واڌ کي روڪڻ ۾ گهٽ اثرائتو هو.
مرڪب 10 سڀ کان وڌيڪ ڊاکنگ اسڪور (-6.40) سان وڌيڪ ڊرامائي فرق ڏيکاريو، جيڪو PBP2a سان مضبوط پابند لاڳاپي کي ظاهر ڪري ٿو. تنهن هوندي به، ان جي روڪٿام جو زون قطر (3.9 سينٽي ميٽر) مرڪب 7 جي مقابلي ۾ هو، ۽ ان جو MBC (312 μg/100 μL) مرڪب 6، 7، ۽ 13b کان خاص طور تي وڌيڪ هو، جيڪو ڪمزور جراثيم ڪش سرگرمي کي ظاهر ڪري ٿو. اهو مشورو ڏئي ٿو ته سٺي ڊاکنگ اڳڪٿين جي باوجود، مرڪب 10 ٻين محدود عنصرن جهڙوڪ حل پذيري، استحڪام، يا بيڪٽيريا جھلي جي خراب پارگميتا جي ڪري MRSA کي مارڻ ۾ گهٽ اثرائتو هو. اهي نتيجا ان سمجھ جي حمايت ڪن ٿا ته جڏهن ته PBP2a روڪٿام اينٽي بيڪٽيريل سرگرمي ۾ اهم ڪردار ادا ڪري ٿو، اهو آزمائشي مرڪب ۾ مشاهدو ڪيل حياتياتي سرگرمي ۾ فرق کي مڪمل طور تي بيان نٿو ڪري. اهي فرق اهو ظاهر ڪن ٿا ته وڌيڪ تجرباتي تجزين ۽ گهري حياتياتي جائزي جي ضرورت آهي ته شامل اينٽي بيڪٽيريل ميڪانيزم کي مڪمل طور تي واضح ڪيو وڃي.
جدول 4 ۽ ضمني ڊيٽا فائل ۾ ماليڪيولر ڊاڪنگ جا نتيجا ڊاڪنگ اسڪور ۽ اينٽي مائڪروبيل سرگرمي جي وچ ۾ پيچيده تعلق کي اجاگر ڪن ٿا. جيتوڻيڪ مرڪب 6 ۽ 13b ۾ مرڪب 7، 9، 10، ۽ 14 جي ڀيٽ ۾ گهٽ ڊاڪنگ اسڪور آهن، اهي سڀ کان وڌيڪ اينٽي مائڪروبيل سرگرمي ڏيکارين ٿا. انهن جي رابطي جا نقشا (شڪل 11 ۾ ڏيکاريل آهن) ظاهر ڪن ٿا ته انهن جي گهٽ بائنڊنگ اسڪور جي باوجود، اهي اڃا تائين اهم هائيڊروجن بانڊ ۽ π-اسٽيڪنگ رابطي ٺاهيندا آهن PBP2a جي اهم باقيات سان جيڪي اينزيم-انبيٽر ڪمپليڪس کي حياتياتي طور تي فائديمند انداز ۾ مستحڪم ڪري سگهن ٿا. 6 ۽ 13b جي نسبتاً گهٽ ڊاڪنگ اسڪور جي باوجود، انهن جي وڌايل اينٽي مائڪروبيل سرگرمي مان ظاهر ٿئي ٿو ته ٻين خاصيتن جهڙوڪ حل پذيري، استحڪام، ۽ سيلولر اپٽيڪ کي ڊاڪنگ ڊيٽا سان گڏ سمجهيو وڃي جڏهن انبيٽر صلاحيت جو جائزو ورتو وڃي. اهو نئين مرڪب جي علاج جي صلاحيت جو صحيح جائزو وٺڻ لاءِ تجرباتي اينٽي مائڪروبيل تجزيو سان ڊاڪنگ مطالعي کي گڏ ڪرڻ جي اهميت کي اجاگر ڪري ٿو.
اهي نتيجا نمايان ڪن ٿا ته جڏهن ته ماليڪيولر ڊاکنگ پابند لاڳاپي جي اڳڪٿي ڪرڻ ۽ روڪڻ جي امڪاني ميڪانيزم جي سڃاڻپ ڪرڻ لاءِ هڪ طاقتور اوزار آهي، ان تي صرف antimicrobial افاديت کي طئي ڪرڻ لاءِ انحصار نه ڪيو وڃي. ماليڪيولر ڊيٽا مشورو ڏئي ٿو ته PBP2a انحراف هڪ اهم عنصر آهي جيڪو antimicrobial سرگرمي کي متاثر ڪري ٿو، پر حياتياتي سرگرمي ۾ تبديليون اهو ظاهر ڪن ٿيون ته علاج جي افاديت کي وڌائڻ لاءِ ٻين جسماني ڪيميڪل ۽ فارماڪوڪائنيٽڪ ملڪيتن کي بهتر بڻايو وڃي. مستقبل جي مطالعي کي بايو دستيابي ۽ سيلولر اپٽيڪ کي بهتر بڻائڻ لاءِ مرڪب 7 ۽ 10 جي ڪيميائي structure کي بهتر ڪرڻ تي ڌيان ڏيڻ گهرجي، انهي کي يقيني بڻائڻ ته مضبوط ڊاکنگ رابطي کي حقيقي antimicrobial سرگرمي ۾ ترجمو ڪيو وڃي. وڌيڪ مطالعي، جنهن ۾ اضافي بايو ايسي ۽ structure-activity relationship (SAR) تجزيو شامل آهن، اسان جي سمجھ کي اڳتي وڌائڻ لاءِ اهم هوندو ته اهي مرڪب PBP2a انحبيٽرز جي طور تي ڪيئن ڪم ڪن ٿا ۽ وڌيڪ اثرائتي antimicrobial ايجنٽ کي ترقي ڪرڻ لاءِ.
3-(anthracen-9-yl)-2-cyanoacryloyl chloride 4 مان ٺهيل مرکبات مختلف درجي جي antimicrobial سرگرمي کي ظاهر ڪيو، ڪيترن ئي مرکبات سان گڏ ميٿيسيلين مزاحمتي Staphylococcus aureus (MRSA) جي اهم روڪٿام جو مظاهرو ڪيو. ساخت-سرگرمي تعلق (SAR) تجزيي انهن مرکبات جي antimicrobial افاديت جي بنيادي بنيادي ڍانچي خاصيتن کي ظاهر ڪيو.
ايڪريلونائٽرائل ۽ اينٿراسين ٻنهي گروپن جي موجودگي اينٽي مائڪروبيل سرگرمي کي وڌائڻ لاءِ اهم ثابت ٿي. ايڪريلونائٽرائل ۾ انتهائي رد عمل وارو نائٽرائل گروپ بيڪٽيريا پروٽين سان رابطي کي آسان بڻائڻ لاءِ ضروري آهي، ان ڪري مرڪب جي اينٽي مائڪروبيل خاصيتن ۾ حصو وٺندو آهي. ايڪريلونائٽرائل ۽ اينٿراسين ٻنهي تي مشتمل مرکبات مسلسل مضبوط اينٽي مائڪروبيل اثرات جو مظاهرو ڪيو. اينٿراسين گروپ جي خوشبوءِ انهن مرکبن کي وڌيڪ مستحڪم ڪيو، ممڪن طور تي انهن جي حياتياتي سرگرمي کي وڌايو.
هيٽروسائڪلڪ رِنگز جي تعارف سان ڪيترن ئي ڊيريويٽوز جي اينٽي بيڪٽيريل افاديت ۾ نمايان طور تي بهتري آئي. خاص طور تي، بينزوٿيازول ڊيريويٽو 13b ۽ ايڪريل هائيڊرازيڊ ڊيريويٽو 6 تقريبن 4 سينٽي ميٽر جي انبيڪشن زون سان سڀ کان وڌيڪ اينٽي بيڪٽيريل سرگرمي ڏيکاري. انهن هيٽروسائڪلڪ ڊيريويٽوز وڌيڪ اهم حياتياتي اثر ڏيکاريا، جنهن مان ظاهر ٿئي ٿو ته هيٽروسائڪلڪ ڍانچي اينٽي بيڪٽيريل اثرات ۾ اهم ڪردار ادا ڪري ٿي. ساڳئي طرح، مرڪب 9 ۾ پيريميڊينيٿيون، مرڪب 10 ۾ ٿيوپيرازول، ۽ مرڪب 11 ۾ ٽيٽرازائن رنگ مرڪب جي اينٽي بيڪٽيريل خاصيتن ۾ حصو ورتو، هيٽروسائڪلڪ ترميم جي اهميت کي وڌيڪ اجاگر ڪيو.
ٺهيل مرڪبن ۾، 6 ۽ 13b پنهنجي بهترين اينٽي بيڪٽيريل سرگرمين لاءِ نمايان هئا. مرڪب 6 جو گھٽ ۾ گھٽ روڪڻ وارو ڪنسنٽريشن (MIC) 9.7 μg/100 μL هو، ۽ گھٽ ۾ گھٽ بيڪٽيريا مار ڪنسنٽريشن (MBC) 78.125 μg/100 μL هو، جيڪو ميٿيسلن مزاحمتي اسٽيفيلوڪوڪس اوريئس (MRSA) کي صاف ڪرڻ جي ان جي بهترين صلاحيت کي اجاگر ڪري ٿو. ساڳئي طرح، مرڪب 13b ۾ 4 سينٽي ميٽر جو انبيڪشن زون ۽ گهٽ MIC ۽ MBC قدر هئا، جيڪي ان جي طاقتور اينٽي بيڪٽيريل سرگرمي جي تصديق ڪن ٿا. اهي نتيجا انهن مرڪبن جي بايو افاديت کي طئي ڪرڻ ۾ ايڪريلوهائيڊرازائيڊ ۽ بينزوٿيازول فنڪشنل گروپن جي اهم ڪردارن کي اجاگر ڪن ٿا.
ان جي ابتڙ، مرڪب 7، 10، ۽ 14 وچولي اينٽي بيڪٽيريل سرگرمي جو مظاهرو ڪيو جنهن ۾ 3.65 کان 3.9 سينٽي ميٽر تائين جي روڪٿام زون هئا. انهن مرڪبن کي بيڪٽيريا کي مڪمل طور تي مارڻ لاءِ وڌيڪ ڪنسنٽريشن جي ضرورت هئي، جيئن انهن جي نسبتا اعلي MIC ۽ MBC قدرن مان ظاهر ٿئي ٿو. جيتوڻيڪ اهي مرڪب 6 ۽ 13b جي ڀيٽ ۾ گهٽ سرگرم هئا، انهن اڃا تائين اهم اينٽي بيڪٽيريل صلاحيت ڏيکاري، اهو مشورو ڏئي ٿو ته هيٽروسائڪلڪ رنگ ۾ ايڪريلونائٽرائل ۽ اينٿراسين moieties جي شموليت انهن جي اينٽي بيڪٽيريل اثر ۾ حصو وٺندي آهي.
انهن مرڪبن ۾ عمل جا مختلف طريقا آهن، ڪجهه جراثيم ڪش خاصيتون ڏيکارين ٿا ۽ ٻيا بيڪٽيرياسٽٽڪ اثر ڏيکارين ٿا. مرڪب 7، 11، 13a، ۽ 15 جراثيم ڪش آهن ۽ بيڪٽيريا کي مڪمل طور تي مارڻ لاءِ گهٽ ڪنسنٽريشن جي ضرورت آهي. ان جي ابتڙ، مرڪب 6، 13b، ۽ 14 بيڪٽيرياسٽٽڪ آهن ۽ گهٽ ڪنسنٽريشن تي بيڪٽيريا جي واڌ کي روڪي سگهن ٿا، پر بيڪٽيريا کي مڪمل طور تي مارڻ لاءِ وڌيڪ ڪنسنٽريشن جي ضرورت آهي.
مجموعي طور تي، ساخت-سرگرمي جي تعلق جو تجزيو اهم اينٽي بيڪٽيريل سرگرمي حاصل ڪرڻ لاءِ ايڪريلونائٽرائل ۽ اينٿراسين مونٽيز ۽ هيٽروسائڪلڪ ساختن کي متعارف ڪرائڻ جي اهميت کي اجاگر ڪري ٿو. اهي نتيجا تجويز ڪن ٿا ته انهن ساخت جي اجزاء جي اصلاح ۽ حل پذيري ۽ جھلي جي پارگميتا کي بهتر بڻائڻ لاءِ وڌيڪ ترميمن جي ڳولا وڌيڪ اثرائتي اينٽي MRSA دوائن جي ترقي جو سبب بڻجي سگهي ٿي.
سڀني ري ايجنٽس ۽ سالوينٽس کي معياري طريقيڪار (ايل گومھوريا، مصر) استعمال ڪندي صاف ۽ خشڪ ڪيو ويو. پگھلڻ جا نقطا گيلن ڪيمپ اليڪٽرانڪ پگھلڻ واري نقطي جي اپريٽس استعمال ڪندي طئي ڪيا ويا ۽ بغير ڪنهن اصلاح جي رپورٽ ڪيا ويا. انفراريڊ (IR) اسپيڪٽرا (cm⁻1) ڪيمسٽري ڊپارٽمينٽ، فيڪلٽي آف سائنس، اين شمس يونيورسٽي ۾ ٿرمو اليڪٽران نڪوليٽ iS10 FTIR اسپيڪٽروميٽر (ٿرمو فشر سائنٽيفڪ، والٿم، ايم اي، آمريڪا) تي پوٽاشيم برومائيڊ (KBr) پيليٽس استعمال ڪندي رڪارڊ ڪيا ويا.
1H NMR اسپيڪٽرا 300 MHz تي GEMINI NMR اسپيڪٽروميٽر (GEMINI Manufacturing & Engineering, Anaheim, CA, USA) ۽ BRUKER 300 MHz NMR اسپيڪٽروميٽر (BRUKER Manufacturing & Engineering, Inc.) استعمال ڪندي حاصل ڪيا ويا. Tetramethylsilane (TMS) کي اندروني معيار طور استعمال ڪيو ويو ڊيوٽيريٽرڊ ڊائميٿائل سلفوڪسائيڊ (DMSO-d₆) سان. NMR ماپون فيڪلٽي آف سائنس، قاهره يونيورسٽي، گيزا، مصر ۾ ڪيون ويون. عنصري تجزيو (CHN) هڪ Perkin-Elmer 2400 عنصري تجزيه نگار استعمال ڪندي ڪيو ويو ۽ حاصل ڪيل نتيجا حساب ڪيل قدرن سان سٺي معاهدي ۾ آهن.
تيزاب 3 (5 ايم ايم او ايل) ۽ ٿائنيل ڪلورائڊ (5 ايم ايل) جو مرکب 65 °C تي 4 ڪلاڪن لاءِ پاڻي جي غسل ۾ گرم ڪيو ويو. گھٽ دٻاءُ هيٺ ڊسٽليشن ذريعي اضافي ٿائنيل ڪلورائڊ کي هٽايو ويو. نتيجي ۾ ڳاڙهي ٺوس کي گڏ ڪيو ويو ۽ وڌيڪ صاف ڪرڻ کان سواءِ استعمال ڪيو ويو. پگھلڻ جو نقطو: 200-202 °C، پيداوار: 88.5٪. IR (KBr، ν، cm−1): 2224 (C≡N)، 1737 (C=O). 1H-NMR (400 MHz، DMSO-d6) δ (ppm): 9.26 (s، 1H، CH=)، 7.27-8.57 (m، 9H، هيٽروآروميٽائيزيشن). 13C NMR (75 MHz، DMSO-d6) δ (ppm): 115.11 (C≡N)، 124.82–130.53 (CH اينٿراسين)، 155.34، 114.93 (CH=C–C=O)، 162.22 (C=O)؛ HRMS (ESI) m/z [M + H]+: 291.73111. تجزيه نگار. C18H10ClNO (291.73) لاءِ حساب ڪيو ويو: C، 74.11؛ H، 3.46؛ N، 4.80. مليو: C، 74.41؛ H، 3.34؛ N، 4.66٪.
0°C تي، 4 (2 mmol، 0.7 g) کي اينهائيڊروس ڊاءِ آڪسين (20 ml) ۾ حل ڪيو ويو ۽ هائيڊرازين هائيڊريٽ (2 mmol، 0.16 ml، 80%) کي ڊراپ وائيز شامل ڪيو ويو ۽ 1 ڪلاڪ لاءِ هلايو ويو. تيار ٿيل ٺوس کي فلٽريشن ذريعي گڏ ڪيو ويو ۽ مرڪب 6 ڏيڻ لاءِ ايٿانول مان ٻيهر ڪرسٽل ڪيو ويو.
سائو ڪرسٽل، پگھلڻ جو نقطو 190-192℃، پيداوار 69.36%؛ IR (KBr) ν=3424 (NH)، 2228 (C≡N)، 1720 (C=O)، 1621 (C=N) cm−1. 1H-NMR (400 MHz، DMSO-d6) δ (ppm): 9.3 (br s، H، NH، مٽاسٽا لائق)، 7.69-8.51 (m، 18H، هيٽروآروميٽڪس)، 9.16 (s، 1H، CH=)، 8.54 (s، 1H، CH=)؛ C33H21N3O (475.53) لاءِ حساب ڪيل قدر: C، 83.35؛ H، 4.45؛ N، 8.84. مليو: C، 84.01؛ H، 4.38؛ ن، 8.05٪.
4 (2 mmol، 0.7 g) کي 20 ml اينهائيڊروس ڊاءِ آڪسين محلول (جنهن ۾ ٽرائيٿيلامائن جا ڪجهه ڦڙا شامل آهن) ۾ ڳاريو، فينائل هائيڊرازين/2-امينوپائريڊائن (2 mmol) شامل ڪريو ۽ ڪمري جي حرارت تي ترتيب سان 1 ۽ 2 ڪلاڪن لاءِ هلايو. رد عمل جي مرکب کي برف يا پاڻي ۾ وجھو ۽ پتلي هائيڊروڪلورڪ ايسڊ سان تيزابي بڻايو. الڳ ٿيل ٺوس کي فلٽر ڪريو ۽ 7 حاصل ڪرڻ لاءِ ايٿانول مان ٻيهر ڪرسٽلائيز ڪريو ۽ 8 حاصل ڪرڻ لاءِ بينزين مان ٻيهر ڪرسٽلائيز ڪريو.
سائو ڪرسٽل، پگھلڻ جو نقطو 160-162℃، پيداوار 77٪؛ IR (KBr، ν، cm−1): 3245 (NH)، 2222 (C≡N)، 1691 (C=O)، 1671 (C=O) cm−1. 1H-NMR (400 MHz، DMSO-d6): δ (ppm): 10.88 (s، 1H، NH، مٽاسٽا لائق)، 9.15 (s، 1H، CH=)، 8.81 (s، 1H، CH=)، 6.78-8.58 (m، 23H، هيٽروآروميٽڪس)؛ C42H26N4O2 (618.68) لاءِ حساب ڪيل قدر: C، 81.54؛ H، 4.24؛ N، 9.06. مليو: C، 81.96؛ ايڇ، 3.91؛ ن، 8.91٪.
4 (2 mmol، 0.7 g) کي 20 ml اينهائيڊروس ڊاءِ آڪسين محلول (جنهن ۾ ٽرائيٿيلامائن جا ڪجهه ڦڙا شامل هئا) ۾ حل ڪيو ويو، 2-امينوپائريڊائن (2 mmol، 0.25 g) شامل ڪيو ويو ۽ مرکب کي ڪمري جي حرارت تي 2 ڪلاڪن لاءِ هلايو ويو. رد عمل جو مرکب برف جي پاڻي ۾ وجھي ۽ پتلي هائيڊروڪلورڪ ايسڊ سان تيزابي بڻايو ويو. ٺهيل پريزيٽيٽ کي فلٽر ڪيو ويو ۽ بينزين مان ٻيهر ڪرسٽل ڪيو ويو، جنهن سان 8 جا سائي ڪرسٽل ڏنا ويا جن جو پگھلڻ جو نقطو 146-148 °C ۽ پيداوار 82.5% هئي؛ انفراريڊ اسپيڪٽرم (KBr) ν: 3148 (NH)، 2222 (C≡N)، 1665 (C=O) cm−1. 1H NMR (400 MHz، DMSO-d6): δ (ppm): 8.78 (s، H، NH، مٽاسٽا لائق)، 9.14 (s، 1H، CH=)، 7.36-8.55 (m، 13H، هيٽرو آروميٽائيزيشن)؛ C23H15N3O (348.38) لاءِ حساب ڪيو ويو: C، 79.07؛ H، 4.33؛ N، 12.03. مليو: C، 78.93؛ H، 3.97؛ N، 12.36٪.
مرڪب 4 (2 mmol، 0.7 g) کي 20 ml خشڪ ڊاءِ آڪسين ۾ حل ڪيو ويو (جنهن ۾ ٽرائيٿيلامائن جا ڪجهه ڦڙا ۽ 2 mmol ٿيوريا/سيميڪاربازائيڊ شامل هئا) ۽ 2 ڪلاڪن لاءِ ريفليڪس هيٺ گرم ڪيو ويو. محلول کي ويڪيوم ۾ بخارات بڻايو ويو. باقيات کي ڊاءِ آڪسين مان ٻيهر ڪرسٽلائيز ڪيو ويو ته جيئن مرکب ملي سگهي.